可直接标靶 p53 或 RAS，新型双特异性抗体诞生？

许多癌症含有肿瘤抑制基因 TP53（编码 p53 蛋白）、致癌基因 RAS 的突变。然而，目前尚未有直接标靶 TP53 和 RAS 的药物上市。

近日，约翰霍普金斯大学（Johns Hopkins University）的研究团队开发出一种新型双特异性抗体，能各自标靶 p53、RAS 蛋白、T 细胞受体 TCRβ。在实验室细胞和动物肿瘤模型中，该双特异性抗体也击杀了肿瘤细胞。

新型双特异性抗体如何生成？

该研究团队利用 CRISPR 来改变癌细胞的特定基因突变或破坏负责呈现突变胜肽的 HLA 类型，制造出 T 细胞辨识癌症突变基因片段且不标靶正常细胞的双特异性抗体。该抗体包含一种特异性辨识癌细胞的成分和另一种辨识免疫细胞的成分，可将癌细胞和免疫细胞结合在一起，以破坏癌细胞。

RAS-HLA 双特异性抗体

他们使用大型噬菌体文库找寻突变 RAS 胜肽-HLA 复合物的单链可变片段（single-chain variable fragments, scFv），然后测试了多种双特异性 T 细胞接合抗体制剂，发现将 scFv 与抗 CD3 scFv 结合的单链双抗体（single-chain diabodies, scDbs）能够诱导 T 细胞活化，并随后杀死 RAS 胜肽突变的肿瘤细胞。相关结果刊登于《Science Immunology》。

p53 -HLA 双特异性抗体

他们使用不同抗体可变片段的大型噬菌体文库鉴定了 H2 这个抗体片段。该片段与p53 R175H 胜肽-HLA 复合物具有高亲和力，但与野生型对应物没有高亲和力。后，他们透过将 H2与结合至 T 细胞上受体 CD3 复合物的抗体片段融合，将 H2 转化为双特异性单链双抗体。尽管 p53 R175H胜肽-HLA复合物在细胞表面的密度非常低，但双特异性抗体仍能有效活化 T 细胞分泌细胞因子并杀死靶癌细胞。这种杀伤与同源 HLA 和特定 TP53 突变的表现有关。另外，该抗体在肿瘤小鼠模型中，也抑制人类异种移植肿瘤生长。相关结果刊登于《Science》。

TCRβ -HLA 双特异性抗体

他们分析正常细胞和癌细胞中的 30 个 TCRβ 链可变基因家族之一（TRBV1 至 TRBV30）。然后，他们透过过证明标靶 TRBV5-5（α-V5）或 TRBV12（α-V12）的双特异性抗体在体外特异性裂解了相关的恶性 T 细胞株和患者来源的 T 细胞白血病，来证实单一 TRBV 家族成员的双特异性抗体杀死这些癌细胞，同时保留表现其他 29 种TRBV家族成员中任何一个的健康 T 细胞。然后，在T 细胞肿瘤小鼠模型，该抗体也能抑制肿瘤。相关结果刊登于《Science Translational Medicine》。