先天性视网膜裂损症（X-linked juvenile retinoschisis, XLRS）是一种视力障碍的疾病，其始于儿童期，几乎只有在男性才会发生。大部分的患者在开始上学发生视力变差和阅读困难，才被诊断出青少年 XLRS，少数患者在婴儿期就开始斜眼和眼睛的非自愿运动（眼球震颤）。目前已鉴定出视网膜色素 1（retinoschisin 1, RS1）基因上约有 200 个位点突变会造成 XLRS 相关功能性视黄素的减少或完全丧失，且破坏视网膜细胞的维持和组织。全球约 5000 名至 25000 名男性中占 1 名 XLRS 患者。台湾目前约有 1500 至 2000 名 XLRS 患者。
台北荣民总医院医研部邱士华主任指出，先前有腺相关病毒（AAV）将外源 RS1 基因引入视网膜的治疗方法，但是后来证明其效果有限。
近日，由台北荣民总医院和加州大学洛杉矶分校（University of California, Los Angeles, UCLA）组成的研发团队以超分子奈米粒子（supramolecular nanoparticle, SMNP）为载体，再透过 CRISPR-Cas9 基因编辑技术，然后经由玻璃体内注射（intravitreally inject）或视网膜下注射至小鼠眼内，可望修复 RS1 基因，进而治疗 XLRS，相关研究结果刊登于《Advanced Science》。
该研究团队首先确定了二个 SMNP 载体，其一具有 Cas9 和一个指引 RNA（sgRNA）质粒，其二具有 Donor-RS1 和绿色萤光蛋白（green fluorescent protein, GFP）质粒，具有最佳的传递性能。然后，他们借由 SMNP 载体将 携带 RS1/GFP 基因的 CRISPR/Cas9 敲入的小鼠活体内或活体外的Rosa26 安全港位点（safe‐harbor site）。
体内研究包括将二种 SMNP 载体玻璃体内注射到小鼠眼中，然后通过眼底照相机和光学同调断层扫描术（optical coherence tomography, OCT），反复拍摄眼睛影像，并对收集的视网膜组织进行病理和分子分析。另外，小鼠的眼睛保持其解剖学完整性，单拷贝 3.0kb RS1/GFP 基因精确整合到视网膜中的 Rosa26 位点，并且整合的 RS1/GFP 基因在视网膜中表现，显示 CRISPR/Cas9 已经成功将 RS1/GFP 基因敲入目标处。
邱士华主任指出，他们目前已经完成小鼠试验，接下来会与国家实验动物中心连系，逐步进行大鼠、猪只的试验，最快 2 至 3 年可望进入人体试验，未来规划于台北荣总执行。
延伸阅读：恢复新视界 视网膜病变基因疗法参考资料：
1. Surv. Ophthalmol. 2004, 49, 214.
2. Adv. Sci. 2020, 1903432
3. https://ghr.nlm.nih.gov/condition/x-linked-juvenile-retinoschisis
4. https://news.ltn.com.tw/news/life/breakingnews/3141389
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