近年來，CRISPR技術在疾病檢測領域的應用日益廣泛，特別是dCas9結合sgRNA的側向流動檢測（Lateral Flow Assay, LFA）方法，因其快速、簡便的特性，備受青睞。然而，一項針對人類乳突病毒（HPV）16和18型檢測的研究顯示，過量的生物素（Biotin）可能對基於CRISPR-dCas9-sgRNA的LFA檢測造成干擾，影響結果判讀。
研究背景與目的
HPV16和18型是引發子宮頸癌的主要病毒型別，早期檢測對於預防和治療至關重要。LFA檢測因其無需複雜儀器、操作簡便，適合大規模篩檢。研究人員嘗試將CRISPR技術應用於HPV16/18的LFA檢測，旨在提高檢測的靈敏度和特異性。然而，在實驗過程中，他們發現高濃度的生物素可能會干擾檢測結果的顯色。
研究方法與發現
該研究採用CRISPR-dCas9-sgRNA系統，設計針對HPV16和18型特定序列的sgRNA，並結合LFA檢測條。研究人員在不同濃度的生物素存在下，進行了HPV16/18的檢測。結果顯示，當生物素濃度過高時，LFA檢測條上的顯色反應受到抑制，導致假陰性或難以判讀的結果。
具體而言，研究人員觀察到，在生物素濃度超過一定閾值後，檢測條上的測試線（Test Line）顏色明顯變淡，甚至消失。這表明過量的生物素可能與檢測系統中的某些成分發生結合，阻礙了目標序列的正常檢測流程，進而影響了顯色。
生物素干擾機制分析
生物素是一種維生素，廣泛存在於食物和保健品中。它與生物素結合蛋白（如鏈黴親和素、抗生物素蛋白）具有極高的親和力。在CRISPR-dCas9-sgRNA LFA檢測中，通常會利用生物素-鏈黴親和素系統進行信號放大或目標捕獲。
研究人員推測，過量的生物素可能與檢測系統中的鏈黴親和素或抗生物素蛋白競爭性結合，導致這些蛋白無法有效結合到目標序列或信號分子上，從而降低了檢測的靈敏度和準確性。此外，高濃度的生物素也可能干擾抗體與抗原的結合，進一步影響顯色。
臨床意義與建議
這項研究結果提示，在進行基於CRISPR的LFA檢測時，應注意生物素的干擾。對於正在服用含有高劑量生物素補充劑的患者，應建議其在檢測前暫停服用一段時間，以避免假陰性結果的產生。
此外，研究人員建議，在開發基於CRISPR的LFA檢測時，應充分考慮生物素的潛在干擾，並採取相應的措施，例如優化檢測系統的設計，使用更穩定的生物素結合蛋白，或採用其他信號放大策略，以提高檢測的抗干擾能力。
總結與研判
雖然這項研究是一個“陰性發現”，但它揭示了CRISPR技術應用於LFA檢測時可能存在的潛在問題。生物素的干擾是一個不容忽視的因素，特別是在臨床檢測中，必須確保檢測結果的準確性和可靠性。未來的研究應進一步探討生物素干擾的具體機制，並開發更穩健、抗干擾的CRISPR-LFA檢測方法，以更好地服務於疾病的早期診斷和預防。
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原始資料來源: GO-AI-6號機 Date: April 18, 2026