近年來,CRISPR 技術在疾病檢測領域的應用日益廣泛,其中基於 CRISPR-dCas9-sgRNA 的側向流動免疫層析 (Lateral Flow Assay, LFA) 快篩檢測,因其快速、簡便、成本效益高等優點,被視為 HPV (人類乳突病毒) 篩檢的潛力工具。然而,一項最新研究指出,過量生物素 (Biotin) 的存在,可能會嚴重干擾此類快篩檢測的顯色,導致假陰性結果,為 HPV16 和 HPV18 的精準檢測帶來挑戰。
生物素干擾:快篩檢測的潛在風險
生物素,又稱維生素 B7,是一種人體必需的營養素,廣泛存在於食物中,也被許多人作為膳食補充劑服用,以促進頭髮、皮膚和指甲的健康。然而,高劑量的生物素會干擾許多基於生物素-鏈黴親和素 (Biotin-Streptavidin) 相互作用的免疫檢測,包括 ELISA (酶聯免疫吸附試驗) 和 LFA。
該研究團隊針對基於 CRISPR-dCas9-sgRNA 的 LFA 快篩檢測 HPV16 和 HPV18 的可行性進行了評估。他們發現,當樣本中含有過量生物素時,會與檢測系統中的鏈黴親和素結合,阻斷其與標記抗體的結合,進而抑制顯色反應,導致假陰性結果。
數據與事實:量化生物素的干擾程度
研究人員通過實驗數據證實了生物素的干擾效應。他們在含有 HPV16 或 HPV18 DNA 的樣本中加入不同濃度的生物素,然後進行 LFA 快篩檢測。結果顯示,隨著生物素濃度的增加,檢測線的顯色強度逐漸減弱,甚至完全消失。
具體而言,當生物素濃度達到一定閾值時,LFA 快篩檢測的靈敏度顯著下降,無法檢測到低濃度的 HPV16 或 HPV18 DNA。這意味著,如果受檢者在檢測前攝入了高劑量的生物素,即使感染了 HPV16 或 HPV18,也可能得到陰性結果。
挑戰與展望:如何克服生物素干擾
這項研究結果提醒我們,在開發和應用基於 CRISPR-dCas9-sgRNA 的 LFA 快篩檢測時,必須考慮生物素干擾的潛在風險。為了提高檢測的準確性,可以採取以下措施:
告知受檢者:
在進行檢測前,應告知受檢者停止服用生物素補充劑一段時間 (例如 72 小時),以降低體內生物素濃度。
開發抗干擾技術:
研究人員可以開發新的檢測方法,例如使用不依賴生物素-鏈黴親和素相互作用的標記系統,或者加入生物素清除劑,以消除生物素的干擾。
優化檢測流程:
通過優化檢測流程,例如增加樣本稀釋倍數或調整反應時間,可以降低生物素的干擾效應。
總結與研判:謹慎看待快篩結果,重視臨床判斷
雖然基於 CRISPR-dCas9-sgRNA 的 LFA 快篩檢測具有快速、簡便的優點,但在實際應用中,必須謹慎看待檢測結果,特別是對於正在服用生物素補充劑的受檢者。
過量生物素的干擾可能會導致假陰性結果,延誤 HPV16 和 HPV18 的診斷和治療。因此,在臨床實踐中,醫生應綜合考慮受檢者的病史、臨床表現和其他檢測結果,做出全面的判斷。同時,研究人員應繼續努力,開發更準確、更可靠的 HPV 快篩檢測方法,以提高疾病的早期診斷率和治療效果。這項研究揭示了生物素干擾在 CRISPR 快篩檢測中的潛在問題,提醒我們在推廣新技術的同時,必須充分評估其局限性,並採取有效措施加以克服。
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原始資料來源: GO-AI-6號機 Date: April 18, 2026


