臨床腸道菌分離株抗藥性快速鑑定新利器
近年來，抗藥性細菌的蔓延已成為全球公共衛生領域的一大挑戰。腸道菌科細菌 (Enterobacterales) 是常見的感染源，而碳青黴烯類抗生素和黏菌素是治療嚴重感染的最後防線。然而，由於抗藥性基因的出現和傳播，這些藥物的療效正受到嚴峻威脅。因此，快速且準確地鑑定這些抗藥性基因對於指導臨床治療、控制感染傳播至關重要。
傳統的抗藥性檢測方法，如培養和藥敏試驗，耗時較長，無法滿足臨床快速診斷的需求。分子診斷技術，如聚合酶連鎖反應 (PCR)，可以快速檢測特定的抗藥性基因，但傳統的PCR方法通常只能檢測單一或少數幾個基因，效率較低。
為了解決上述問題，一種新的檢測方法——高解析度熔解曲線多重即時聚合酶連鎖反應 (HRM-multiplex real-time PCR) 應運而生。這項技術結合了多重PCR和高解析度熔解曲線分析的優勢，能夠在一次反應中同時檢測多個抗藥性基因，並根據不同的熔解曲線圖譜區分不同的基因。
HRM-multiplex real-time PCR 的優勢
相較於傳統方法，HRM-multiplex real-time PCR具有以下顯著優勢：
高通量和快速性：
能夠在短時間內同時檢測多個抗藥性基因，大幅縮短檢測時間，加速臨床決策。
高靈敏度和特異性：
能夠準確檢測低濃度的抗藥性基因，並有效區分不同的基因，避免假陽性和假陰性結果。
成本效益：
減少了試劑和人工成本，提高了檢測效率。
操作簡便：
實驗流程相對簡單，易於在臨床實驗室推廣應用。
實際應用與數據
研究顯示，HRM-multiplex real-time PCR在檢測碳青黴烯類抗藥性基因（如 *bla*KPC、*bla*NDM、*bla*OXA-48 like）和黏菌素抗藥性基因（如 *mcr-1*）方面具有很高的準確性和靈敏度。例如，一項研究比較了HRM-multiplex real-time PCR與傳統PCR在檢測臨床腸道菌分離株中碳青黴烯類抗藥性基因的表現，結果顯示，HRM-multiplex real-time PCR的靈敏度和特異性均達到95%以上，且檢測時間縮短了50%以上。
另一項研究利用HRM-multiplex real-time PCR對某醫院的腸道菌感染進行了監測，發現 *bla*NDM基因的檢出率明顯高於其他碳青黴烯類抗藥性基因，提示該醫院可能存在NDM型碳青黴烯酶的流行。這些數據為醫院感染控制提供了重要的參考依據。
面臨的挑戰與未來展望
儘管HRM-multiplex real-time PCR具有諸多優勢，但仍面臨一些挑戰。例如，抗藥性基因的種類繁多，且不斷出現新的變異，需要不斷更新檢測引物和探針，以確保檢測的覆蓋範圍和準確性。此外，HRM-multiplex real-time PCR的結果需要專業人員進行解讀，需要加強相關人員的培訓。
未來，隨著技術的不斷發展，HRM-multiplex real-time PCR有望在抗藥性細菌的快速診斷和監測中發揮更大的作用。例如，可以開發更為全面的HRM-multiplex real-time PCR檢測試劑盒，覆蓋更多的抗藥性基因，並結合自動化技術，提高檢測效率和準確性。此外，還可以將HRM-multiplex real-time PCR應用於環境樣本的抗藥性基因檢測，以更好地了解抗藥性基因的傳播途徑和風險。
總結與研判
總體而言，高解析度熔解曲線多重即時聚合酶連鎖反應 (HRM-multiplex real-time PCR) 技術為臨床腸道菌分離株中碳青黴烯類和黏菌素抗藥性基因的快速鑑定提供了一個強大的工具。其高通量、快速、靈敏和特異的特性使其在臨床診斷、感染控制和抗藥性監測方面具有廣闊的應用前景。雖然仍存在一些挑戰，但隨著技術的進一步發展和完善，HRM-multiplex real-time PCR有望成為抗藥性細菌防控的重要手段，為改善患者預後和控制抗藥性蔓延做出貢獻。
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原始資料來源: GO-AI-6號機 Date: March 3, 2026