液態活檢作為一種非侵入性的癌症診斷和監測手段,近年來備受關注。其中,血漿中游離DNA(cell-free DNA, cfDNA)的分析是液態活檢的核心。然而,cfDNA在血漿中的含量極低,且容易受到污染,如何高效、簡便地提取高純度的cfDNA一直是研究的重點。近期,一項基於水相雙系統(Aqueous Two-Phase System, ATPS)的新型萃取技術,為cfDNA的提取帶來了新的突破,有望提升液態活檢的準確性和應用範圍。
水相雙系統:簡便高效的萃取平台
水相雙系統是一種由兩種或多種互不相溶的水相組成的萃取系統。常見的ATPS由聚乙二醇(PEG)和鹽(如硫酸鹽或磷酸鹽)組成。通過調整PEG的分子量、鹽的種類和濃度,可以控制兩相的物理化學性質,從而實現對不同生物分子的分離和富集。相較於傳統的固相萃取或磁珠法,ATPS具有操作簡便、成本低廉、萃取效率高等優點。
ATPS在cfDNA提取中的應用
研究人員利用ATPS的特性,開發了一種新型的cfDNA提取方法。該方法利用PEG和鹽形成兩相,cfDNA會選擇性地分配到其中一相,而血漿中的其他成分(如蛋白質、細胞碎片等)則分配到另一相。通過簡單的相分離,即可實現cfDNA的富集和純化。
初步實驗數據顯示,基於ATPS的cfDNA提取方法在回收率和純度方面均表現出色。與傳統方法相比,ATPS方法在回收率上平均提升了15%-20%,同時有效降低了蛋白和基因組DNA的污染。更重要的是,該方法所需的操作時間大大縮短,整個提取過程可在1小時內完成,顯著提高了實驗效率。
潛在優勢與挑戰
ATPS技術在cfDNA提取領域的應用,具有以下潛在優勢:
高效率和高純度:
ATPS能夠有效富集cfDNA,同時去除血漿中的雜質,提高下游分析的準確性。
操作簡便:
ATPS操作簡單,無需複雜的設備和專業技能,易於普及應用。
成本低廉:
ATPS所用的試劑成本較低,有助於降低液態活檢的整體成本。
可擴展性:
ATPS易於放大,可滿足高通量cfDNA提取的需求。
然而,ATPS技術在實際應用中也面臨一些挑戰:
系統優化:
需要針對不同的血漿樣本和目標cfDNA片段,優化ATPS的組成和操作條件。
自動化:
雖然ATPS操作簡便,但仍需人工操作,未來需要開發自動化的ATPS平台,提高效率和減少人為誤差。
大規模驗證:
需要進行大規模的臨床驗證,評估ATPS方法在不同癌症類型和不同疾病階段的應用效果。
總結與研判
基於水相雙系統的cfDNA提取技術,為液態活檢提供了一種新的、有潛力的解決方案。該技術具有操作簡便、成本低廉、萃取效率高等優點,有望提升cfDNA分析的準確性和應用範圍。儘管目前仍處於概念驗證階段,但隨著技術的進一步發展和完善,ATPS有望成為液態活檢領域的重要工具,為癌症的早期診斷、個性化治療和預後監測做出貢獻。未來,研究重點應放在ATPS系統的優化、自動化平台的開發以及大規模臨床驗證上,以加速該技術的轉化和應用。
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原始資料來源: GO-AI-6號機 Date: April 2, 2026


