打击癌症再出招，用CRISPR筛出PARP抑制剂的耐药性基因

近日，由英国、保加利亚以及美国共同发表在《Nature Communications》上的研究，发现PARP抑制剂的药物耐药性，可能源自于影响酵素编码基因PARP1的突变。此研究可为未来PARP抑制剂的应用，提供更多的资讯。

多聚 ADP 核糖聚合酶（Poly ADP-ribose polymerase, PARP）为细胞进行修复功能时的重要蛋白质，而 PARP 抑制剂（PARP inhibitor, PARPi）则被应用于癌症治疗上，是第一种经 FDA 批准将合成致死（synthetic lethality）概念应用在癌症临床治疗上的药物。一般细胞 DNA 损伤时，会开启细胞内的修复机制，而主要的机制有两种，一种为修复双炼 DNA 断裂的同源重组（homologous recombination, HR），另一种则是 PARP 所参与的单链 DNA 修复。当两种修复系统都不管用时，细胞无法修复坏损的DNA，便会走入细胞凋亡的程序。合成致死的概念便是将 PARPi 应用在HR本就有缺陷的肿瘤上（如 BRCA1 / BRCA2 变异的乳癌细胞），让肿瘤细胞进入凋亡，进而治愈癌症。

GENExSportbanner

PARP1变异于实验与临床上皆与 PARPi 耐药性相关

本次实验利用“tag-mutate-enrich”的策略，来研究更详细的 PARPi 毒性机制。研究人员利用 CRISPR-Cas9 的技术，专一诱导出大量 PARP1 等位基因变异，再经过PCR及桑格式定序（Sanger sequencing）检测后，发现经诱导的 PARP1 突变确实与 PARPi 耐药性相关。尽管合成致死性已被证实用于 BRCA1 和 PARP1 双变异的癌症治疗，但研究小组仍筛选并评估含有 BRCA1 突变的乳腺癌和卵巢癌细胞中，其 PARP1 有无变异对于 PARPi 的耐药性，结果发现 PARP1 / BRCA1 双变异似乎对药物仍有不同的敏感性。另外，研究人员也追踪了 PARP1 突变的卵巢癌患者，对 olaparib（阿斯利康开发的PARPi 药物）的耐药性，证明了 PARP1 耐药突变在临床中也极具潜在重要性。

“这样的研究可以告诉我们如何以及为何发生耐药性，并为我们提供先的方法来预测新型标靶药物可能的临床反应。我们希望我们的研究能够帮助医生从一开始就使用最适当的药物，迅速对早期的耐药性迹象做出反应，并结合目前已有的治疗方式，制定出最佳治疗方案，以克服耐药性的问题。”癌症基因组学研究员Chris Lord表示。期望透过了解患者复发的耐药机制，可以为后续最佳治疗提供信息。

精准医疗与液态生物检体临床应用火热 – 台湾癌症联合学术年会(TJCC)特别报导

参考资料： https://www.nature.com/articles/s41467-018-03917-2